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よくある質問 | LONG EGF

よくある質問 | long® EGF

すべて展開

LONG® EGFは、ヒト上皮成長因子(EGF)の組換え類似体であり、ネイティブEGFや組換えヒトEGF(rhEGF)に相当する代替品として、治療用細胞培養用に使用するためのサプリメントとして開発されました。これは、ヒトEGFアミノ酸配列と53アミノ酸のN末端伸長ペプチドで構成されています。

LONG® EGFは、MSC、iPS、上皮細胞、線維芽細胞、HEK293、BHK-21、MDCK細胞株に適用可能です。また、LONG® EGFとLONG®R3 IGF-Iの相乗効果が、特定の細胞株で表れることもあります。

はい。LONG® EGFはcGMP規格に従って製造されています。製造施設は、欧州および米国の委託製造業者とバイオ製薬会社により定期的に監査されています。

LONG® EGFは規制に準拠しており、現在承認、販売されている細胞療法製品の製造に使用されています。

Repligenの製造拠点に関する詳細

いいえ、LONG® EGFは大腸菌プロセスで製造された、cGMPグレードの組換えタンパク質です。動物由来の成分を含まないプロセスを使用して、哺乳類細胞培養用に特化して製造されています。

推奨濃度範囲は10~50 μg/lです。100 μg/lを越えてはいけません。また一般的に、低濃度の場合のほうが高濃度の場合よりも効果があります。最初は、50 μg/lの培地から始めることを推奨します。

フリーズドライタイプのものを培地に溶かすことは推奨しません。

濃度1 mg/ml以上を推奨します。

ペプチドと同様に、LONG® EGFは、他のタンパク質成分が存在しない状態で配管やフィルタに付着する可能性があります。使用前に、投入する培地をタンパク結合率の低いフィルターで滅菌ろ過することをお勧めします。

  1. クリーンベンチなどの制御された環境で、無菌操作ですべての作業を行ってください。
  2. バイアルを開けて中身を大気圧に戻す際には注意が必要です。
  3. 空気充填シリンジは、開封前に圧力を均等化するために、ストッパーを通して導入することができます。
  4. バイアルを10 mMHClを使用して推奨濃度1 mg/mlに再構成します。
  5. バイアルの容量に関係なく、バイアル全体をin situで元に戻してください。凍結乾燥処理で残留する水分によって、実際のタンパク質含有量が過小評価されるため、重量または重量平均によってタンパク質含有量を推定することはお避けください。
  6. 10 mMHClを使用してさらに0.1 mg/mlに希釈し、作業用ストック溶液を作成します。リン酸緩衝生理食塩水(PBS)またはリン酸を含むバッファーを作業ストックの希釈に使用しないでください。タンパク質の沈殿が溶液から発生する可能性があります。
  7. その後の希釈は、PBSまたは細胞培養培地を含む他のバッファー溶液で行うことができます。
  8. ろ過が必要な場合、ろ過中のタンパク質の非特異的結合を回避するために、1 mg/mlまたは0.1 mg/mlの有効な保存液と、タンパク質結合性の低いフィルターメンブレンを使用してろ過を行うことを推奨します。