よくある質問 | LONG EGF

LONG^® EGF is a recombinant analogue of human epidermal growth factor (EGF) developed as a supplement for use in therapeutic cell culture applications as a like for-like replacement for native EGF or recombinant human EGF (rhEGF). It comprises the human EGF amino acid sequence plus a 53 amino acid N-terminal extension peptide.

LONG^® EGFは、MSC、iPS、上皮細胞、線維芽細胞、HEK293、BHK-21、MDCK細胞株に適用可能です。また、LONG^® EGFとLONG^®R³ IGF-Iの相乗効果が、特定の細胞株で表れることもあります。

はい。LONG^® EGFはcGMP規格に従って製造されています。製造施設は、欧州および米国の委託製造業者とバイオ製薬会社により定期的に監査されています。

LONG^® EGFは規制に準拠しており、現在承認、販売されている細胞療法製品の製造に使用されています。

Repligenの製造拠点に関する詳細

No. LONG^® EGF is a cGMP grade recombinant protein produced in E. coli. It is specifically manufactured for mammalian cell culture using a process that is free of animal-derived components.

推奨濃度範囲は10～50 μg/lです。100 μg/lを越えてはいけません。また一般的に、低濃度の場合のほうが高濃度の場合よりも効果があります。最初は、50 μg/lの培地から始めることを推奨します。

フリーズドライタイプのものを培地に溶かすことは推奨しません。

Concentrations of 1mg/ml or more are recommended.

ペプチドと同様に、LONG^® EGFは、他のタンパク質成分が存在しない状態で配管やフィルタに付着する可能性があります。使用前に、投入する培地をタンパク結合率の低いフィルターで滅菌ろ過することをお勧めします。

1. クリーンベンチなどの制御された環境で、無菌操作ですべての作業を行ってください。
2. バイアルを開けて中身を大気圧に戻す際には注意が必要です。
3. An air-filled syringe may be introduced through the stopper to equalize the pressure before opening.
4. Reconstitute the vial to the recommended concentration of 1 mg/ml in 10 mM HCl.
5. バイアルの容量に関係なく、バイアル全体をin situで元に戻してください。凍結乾燥処理で残留する水分によって、実際のタンパク質含有量が過小評価されるため、重量または重量平均によってタンパク質含有量を推定することはお避けください。
6. Dilute further to 0.1 mg/ml using 10 mM HCl to achieve the working stock solution. Do not use phosphate buffered saline (PBS) or a buffer containing phosphate to dilute to the working stock as this can cause the protein to precipitate out of solution.
7. Subsequent dilutions can be made in PBS or other buffered solutions including cell culture media.
8. ろ過が必要な場合、ろ過中のタンパク質の非特異的結合を回避するために、1 mg/mlまたは0.1 mg/mlの有効な保存液と、タンパク質結合性の低いフィルターメンブレンを使用してろ過を行うことを推奨します。